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发布时间:2022-03-13 04:00:00 作者:慧德易科技
液相色谱仪
仪器结构特点:
液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物(常温进样不破坏中的大分子化合物)
色谱柱类型,流动相比例,操作参数(柱温,流动相梯度)可优化分离效果
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液相色谱的主要部件有哪些?
液相色谱的部件按流动相流路的顺序:
流动相→真空脱气机(在线脱气装置)→泵(二元泵和四元泵:区分,有几种流动相按一定比例混合)→进样器(手动和自动)→柱温箱→检测器(紫外:朗伯-比尔定律,质谱:荷质比,荧光:跃迁,elsd:蒸发光)
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正相液相色谱
柱内填充有微小的二氧化硅颗粒和非极性溶剂,例如正己烷。典型柱的内径为4.6 mm或更小,长度为150至250 mm。混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度更快,因为极性化合物比非极性化合物在极性二氧化硅上的粘附时间更长。
为什么液相色谱适合分析低沸点化学物质?
这个说法不能理解成液相色谱不适合分析高沸点物质。
其实这是因为气相色谱一般需要对物质进行加热,然后根据汽化温度(沸点)不同,物质先后进入检测器。检测器一般是氢火焰检测器为主。
如果一个物质沸点太低,那么很容易出峰非常快,和溶剂出在一起,在谱图前端,根本看不出来(如果你看过气相色谱图你就知道了)。
此时就需要用HPLC,因为HPLC分开物质依据的是物质和色谱柱填料的亲和力强弱,而不是沸点。
举个例子,如果我想要知道我一个样本中是否含有(沸点85℃),用气相色谱是非常困难的。因为沸点100℃以下的物质在GC里面出峰是极度困难的。
但是我如果用HPLC配合反相柱,此时就可以看得出来。
多说一点,实际上还有一些情况我不能用HPLC来分析,就是当一个化合物极性非常大或者极性非常小,此时我无论用正相色谱柱还是反相色谱柱,都会有一个问题,就是我的化合物要么出在前面和溶剂在一起,要么根本出不出来。
比如咪唑,咪唑的亲水性太强,我经常在HPLC反相柱里面分离不开,此时一般我要分析,就会借助GC(沸点256℃)
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