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液相色谱柱的结构

（1）液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝（封头）与柱填料等组成。

柱管：多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。压帽：即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。

密封环：位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。

（2）柱填料：

液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱：

多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3-10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合-CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

反相柱：

主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。

常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、等，其颗粒粒径在3-10μm之间。

气相色谱仪检测器介绍

检测器原理：

从色谱柱里出来的  含有分离组分的载气流通过检测器而产生信号，检测器的输出信号经过转化后成为色谱图。

检测器有几种类型，但检测器的功能都是相同的：

当纯的载气（没有待分离组分），

流经检测器时，产生稳定的电信号——基线

当有待分离组分通过检测器时 产生不同的信号

气相色谱检测器种类繁多，有多种分类：

①根据对被检测样品的响应范围可以被分为：

通用型检测器：对绝大多数检测无知均有响应，如：TCD、PI。

选择型检测器：对某一类物质有响应，对其他物质的无响应或很小，如：FPD。

②根据检测器的检测方式不同可以分为：

浓度型检测器：测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，即检测器的响应值和组分的浓度成正比，如TCD、PID。

质量型检测器：测量载气中某组分单位时间内进入检测器的含量变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的质量成正比，如FID、FPD。

③根据信号记录方式不同进行分类：

微分型检测器：微分型检测器的响应与流出组分的浓度或质量成正比，绘出的色谱峰是一系列的峰。

积分型检测器：测量各组分积累的总和，响应值与组分的总质量成正比，色谱图为台阶形曲线，阶高代表组分的总量。

④根据样品是否被破坏可以分为：

破坏性检测器：组分在检测过程中，其分子形式被破坏，例如：FID、NPD、FPD。

非破坏性检测器：组分在检测过程中，保持其分子结构，例如：TCD、PID、ECD。

液相色谱柱基本工作原理

在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。

色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的医学教育网搜集整理。

使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。

液相色谱仪与气相色谱区别

液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的，所以设备的基础原理差不多，但是他们在检测方面是有不相同的地方的，有不相同的，但又有不同之处：液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点：

1、进样方式的不同：液相色谱仪只要将样品制成溶液，而气相色谱需加热气化或裂解；2、流动相的不同，在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力；

3、由于液体的粘度较气体大两个数量级，使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级；

4、由于流动相的化学成分可进行广泛选择，并可配置成二元或多元体系，满足梯度洗脱的需要，因而提高了液相色谱的分辨率（柱效能）；

5、液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相，使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小，流动阻力增大，必须借助高压泵输送流动相；

6、液相色谱仪是在液相中进行，对被测组分的检测，通常采用灵敏的湿法光度检测器，例如，紫外光度检测器、示差折光检测器 、荧光光度检测器等；

7、液相色谱与气相色谱相比较，液相色谱同样具有高灵敏度、能和高速度的特点。

8、液相色谱的定性和定量分析，与气相色谱分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或与其他定强的仪器分析 法连用；在定量分析中，采用测量峰面积的化法、内标法或外标法等，但液相色谱在分离复杂组分式样时，有些组分常不能出峰，因此化法定量受到限制，而内标法定量则被广泛使用。