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发布时间:2021-11-14 05:06:00 作者:慧德易科技
层析填料介质
单分散基球替代多分散基球 层析介质粒径大小和粒径分布是影响层析分离的重要参数。粒径分布越均匀,装柱越容易、柱床越稳定、柱效越高、流速越均匀、洗脱越集中、分离效率越高、流动相用量越少,柱与柱重复性也越好;Protein A 介质被誉为层析介质皇冠上的明珠,价格昂贵,可是市场上Protein A 介质都是采用粒径分布较宽的基球。主要原因是单分散微球制备技术难度极大,世界上可以规模生产的单分散多孔微球只有Dynal公司一家,GE销售的SOURCE 系列单分散聚l色谱填料就是Dynal生产的。但SOURCE 产品的粒径只有30微米,不能满足Protein A 介质对粒径一般要大于40微米的要求。纳微经过多年的努力开发出世l界领l先的微球制备技术,突破大单分散大粒径多孔微球的制备难题,成为家生产单分散Protein A 亲和层析介质的公司。
超大孔单分散聚合物层析介质用于病毒分离纯化
传统生物层析介质不能有效用于病毒分离纯化很主要的原因是其孔径太小,病毒不能扩散到传统层析介质的内孔里,因此可及比表面积低,吸附载量低,而超大孔单分散层析介质由于粒径均匀,孔径大(>400 纳米)因此病毒可以有效的扩散到孔内部空间,使得静态吸附载量大幅度提升。超大孔结构还可以有效降低病毒与填料表面配基之间多位点结合,避免亚基的解聚,使得病毒结构稳定性得到大幅度的提高。另外超大孔聚合物层析介质用于病毒及类病毒(疫l苗)分离纯化的优点是其分离模式与传统生物制药层析分离纯化方法基本一样,容易放大生产,重复性好。但超大孔层析介质制备技术难度大,且其机械强度差,耐压性差,容易破碎,导致筛板堵塞,压力升高等缺点。虽然纳微已经可以制备孔径大于高达800纳米的超大孔径聚合物微球,但要满足病毒大规模分离纯化,还需要进一步解决超大孔微球机械强度问题。
以下为纳微超大孔径DEAE离子交换层析介质在流l感病毒(H5N2)纯化中的数据,结果显示超大孔介质对流l感病毒的分离纯化比传统层析介质具有明显的优势。
1、常用的定量分析方法:标准曲线法、直接定量(外标法和内标法)
2、层析柱主要有:弗罗里硅土柱、氧化铝柱、硅胶柱、活性碳柱、其他填料层析柱子
3、液相色谱的特点是:、高速、高灵敏度、高度自动化
4、气相色谱仪常用的检测器有:火焰离子化检测器(FID)、火焰光度检测器(FPD)
电子捕获检测器(ECD)、氮磷检测器(NPD)、原子发射检测器
5、检测器的评价指标:噪声、漂移、灵敏度、线性范围与动态范围
6、气相色谱柱有:填充柱、毛细管柱(开管型和填充型)
层析填料装置
锥形封头一种负压层析装置,它包括:柱体上端设有快开式紧锁锁紧的上锥形封头和上锥形卡套相互卡接,上锥形封头上部设有负压接口经负压阀、汽液分离器与负压泵相连,柱体下端设有快开式紧锁锁紧的下锥形封头和下锥形卡套相互卡接,下锥形封头下部设有进液接口经进液管道与三通阀体上部的出液接口相连,三通阀体下部分别设有两个与进液管道相连的进液接口。本发明提供一种使用溶剂量少、分离、速度快、周期短,结构简单,无污染,无噪音,低能耗,易操作,一次分离纯度可达98%以上的负压层析装置。
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