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抗l体的层析分离步骤基本

都可以采用标准化的三步曲：步用Protein A介质进行抗l体捕获和浓缩；第二步用离子交换进行中间纯化以去除多聚体，宿主蛋白等杂质；第三步是精纯去除剩余DNA，Endotoxin,Protein A 等微量杂质。在这三步抗l体的分离纯化过程中，步的Protein A亲和捕获占据分离纯化成本80%以上，也是下游分离纯化的瓶颈所在。亲和层析之所以成本高的主要原因：首先是Protein A 价格昂贵，其价格是普通层析介质十几倍；第二，Protein A使用寿命短，一般离子交换填料使用寿命多达1000次，而亲和填料寿命通常在100-200次；第三，Protein A 用于抗l体的捕获和浓缩，需要处理大体积的发酵液，而亲和步骤载量往往又低于阴阳离子交换层析，使得亲和层析介质使用量比中间纯化或精纯的要多得多。因此，要降低抗l体的生产成本，解决抗l体的生产瓶颈关键在于改进步Protein A 亲和捕获。

如何选择固相萃取柱？

是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置，常见的固相萃取柱大都以聚乙烯为材料的注射针筒型装置，该装置内装有两片以玻璃纤维为材料的塞片，两个塞片中间装填有一定量的色谱吸附剂（填料）。

选择固相萃取柱的关键除了要求的规格之外，决定分离性能的是它的填料。在选择萃取柱时，必须根据待检测样品的种类及其物化性质选择合适的填料。固相萃取填料通常是色谱吸附剂，大致可以分为三大类，分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。

1、常用的定量分析方法：标准曲线法、直接定量（外标法和内标法）

2、层析柱主要有：弗罗里硅土柱、氧化铝柱、硅胶柱、活性碳柱、其他填料层析柱子

3、液相色谱的特点是：、高速、高灵敏度、高度自动化

4、气相色谱仪常用的检测器有：火焰离子化检测器（FID）、火焰光度检测器（FPD)

电子捕获检测器（ECD）、氮磷检测器（NPD）、原子发射检测器

5、检测器的评价指标：噪声、漂移、灵敏度、线性范围与动态范围

6、气相色谱柱有：填充柱、毛细管柱（开管型和填充型）

为什么选择纳微色谱和层析介质

纳微拥有世界领i先的单分散硅胶色谱填料和聚合物层析介质的制造技术，及大规模生产能力和质量保障体系从基球的生产到表面改性到装柱全过程都在纳微内部完成以确保产品的可控性，可追溯性及供应安全性纳微色谱填料具有精i确的粒径大小，极窄的粒径分布，可控的孔道结构及优化的表面功能基团密度，使其具有高柱效，易装柱，机械强度高，寿命长等特点。

纳微可生产粒径从1.7-50μm之间任意大小单分散硅胶色谱填料以满足实验室HPLC分析检测到工业制备色谱的各种需求纳微色谱填料基质齐全，包括硅胶，聚ben乙烯及聚丙i烯酸酯三种性能互补的色谱填料纳微色谱填料涵盖正相，反相，手性，离子交换，疏水，体积排阻，亲和层析介质及特殊定制化色谱填料以满足有机化合物，手性分子，天然产物，抗i生素，多肽胰岛素，重组蛋白，抗i体，疫i苗的分离纯化纳微产品已大规模销售到欧美日韩制药公司及世界色谱公司