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液相色谱仪

仪器结构特点：

液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法

流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物（常温进样不破坏中的大分子化合物）

色谱柱类型，流动相比例，操作参数（柱温，流动相梯度）可优化分离效果

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四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的，理论上混合的比例也是准确的，但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟，无论它动作多么快，总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合，在单位时间内，A路和B路的电磁阀各开通50%的时间，这时问题不大，电磁阀的延迟影响可以通过调整补偿系数来尽量弥补。但是如果一点的情况，A路99%，B路1%，这种情况下单位时间内，A路的电磁阀开通99%的时间，B路只占1%，时间是很短的，这时B路电磁阀的延迟就影响很大了，甚至可能延迟的时间比工作的时间还要长，而高压梯度就不会存在这种问题。

为什么液相色谱适合分析低沸点化学物质？

这个说法不能理解成液相色谱不适合分析高沸点物质。

其实这是因为气相色谱一般需要对物质进行加热，然后根据汽化温度（沸点）不同，物质先后进入检测器。检测器一般是氢火焰检测器为主。

如果一个物质沸点太低，那么很容易出峰非常快，和溶剂出在一起，在谱图前端，根本看不出来（如果你看过气相色谱图你就知道了）。

此时就需要用HPLC，因为HPLC分开物质依据的是物质和色谱柱填料的亲和力强弱，而不是沸点。

举个例子，如果我想要知道我一个样本中是否含有（沸点85℃），用气相色谱是非常困难的。因为沸点100℃以下的物质在GC里面出峰是极度困难的。

但是我如果用HPLC配合反相柱，此时就可以看得出来。

多说一点，实际上还有一些情况我不能用HPLC来分析，就是当一个化合物极性非常大或者极性非常小，此时我无论用正相色谱柱还是反相色谱柱，都会有一个问题，就是我的化合物要么出在前面和溶剂在一起，要么根本出不出来。

比如咪唑，咪唑的亲水性太强，我经常在HPLC反相柱里面分离不开，此时一般我要分析，就会借助GC（沸点256℃）