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发布时间:2022-04-14 06:03:00 作者:慧德易科技
为啥要学习使用液相色谱柱?
色谱柱的使用和保养:液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路,建立液相色谱柱日常维护与保养规程,保证能正常使用。
液相色谱柱的适用范围:
本规程适用液相色谱柱的维护与保养。
责任人:
液相色谱柱使用者。
液相色谱柱作用
柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效,这是值得的。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。柱子使用一段时间后,可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶,特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷,使柱效下降,这时也可补加填料使柱效恢复。
每次工作完后,好用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用,应每隔4~5天开机冲洗15分钟。
液相色谱柱优势
硅胶的化学稳定性较差,仅能在pH=2~8的环境下工作。但是,在很多场合下,需要使用的pH条件。为此,人们曾大力发展高分子微球、氧化铝、氧化锆等化学稳定性更好的基质材料。但是,很难有一种材料能地满足液相色谱基质的要求。例如,高分子微球在中会发生一些溶胀,因此难以应用于以含的流动相进行梯度淋洗的场合;氧化铝和氧化锆与硅胶相比,虽然化学稳定性较好,但其表面修饰与键合比较困难。因此,化学稳定性好的碳材料便很自然地被考虑作为色谱填料的基质。
碳材料有的化学稳定性,可耐受宽达pH=1~14的环境;耐高温,石墨化碳可耐3000℃以上的高温而不受破坏;经适当加工的碳材料可具有很好的机械强度,具有优良的导电性、导热性及电磁屏蔽特性。更为难能可贵的是,多孔性碳材料以其结构的特点而具有很好的吸附性及选择性。正是碳材料的这些特性,使人们期待它在色谱领域中能有特殊的用途。
液相色谱仪与气相色谱差别
液相色谱仪在基本概念上和气相色谱器是一致的,因此 设施的基本基本原理类似,可是它们在检查层面是有不一样的地点的,有不一样的,但又有不同点:液相色谱 与气相色谱的关键差别可归结为于以下几个方面:
1、气相方法的不一样:液相色谱仪只需将试样做成水溶液,而气相色谱需加温汽化或裂化;
2、流动相的不一样,在被测组分与流动相中间、流动各相稳定相中间都具有着一定的作用力;
3、因为溶液的黏度较汽体大2个量级,使被测组分在液态流动看中的热扩散系数比在汽体流动看中约小4~5个量级;
4、因为流动相的成分可开展普遍挑选,并可配备成二元或多元化管理体系,达到梯度方向过柱的必须,因此增强了液相色谱的屏幕分辨率(柱效率);
5、液相色谱选用5~10Lm细颗粒物固定不动相,使液体相在离子交换柱上透水性大大的变小,流动摩擦阻力扩大,务必依靠高压水泵运输流动相;
6、液相色谱仪是在液相中开展,对被测组分的检验,一般选用灵巧的湿式亮度检测器,比如,紫外线度检测器、示差折光率检测器 、莹光亮度检测器等;
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